产品中心
PRODUCT CENTER
游离细胞DNA纯化试剂盒
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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AC101 |
BcMag™ 游离细胞DNA纯化试剂盒 |
50preps |
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AC102 |
BcMag™ 游离细胞DNA纯化试剂盒 |
100preps |
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组件 |
存储条件 |
目录号：AC101 |
目录号：AC102 |
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BcMag™ HO-DNA Beads |
4°C |
1.0 ml |
2 ml |
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10x Lysis Buffer |
4°C |
5 ml |
10 ml |
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1x Elution Buffer |
4°C |
0.5ml |
1.0 ml |
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Proteinase K (20mg/ml) |
-20°C |
10 mg |
20 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
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SDS (20%) |
Room temperature |
2.5 ml |
5 ml |
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DTT (20%) |
-20°C |
2.5 ml |
5 ml |
运输条件：在室温环境下运输
储存条件：根据上表要求，在收到试剂盒后，储存不同试剂。
简介
游离细胞DNA (cfDNA)是指来自细胞凋亡或坏死后，在血液或者其他体液中存在的，游离于细胞外的双链DNA片段，包括循环肿瘤DNA（ctDNA）、游离线粒体DNA（ccf-mtDNA）和游离胎儿细胞DNA（cffDNA）。这种DNA从各种细胞来源释放到血液中，例如癌细胞，死细胞和胎儿细胞。cfDNA的提取对于各种应用非常重要，例如无创产前检测，癌症诊断和疾病监测。目前，存在多种游离细胞DNA纯化方法，和基于这些方法和方案变化的许多试剂盒。这些不同的程序和改变导致了一系列不同的游离细胞DNA纯化方式，方法不同可能会影响游离细胞DNA的产量和纯度。由于无细胞样品中存在微量的循环核酸，以及其他污染物（如蛋白质、脂质和RNA）的存在，从血浆、血清和尿液中大规模分离循环核酸回收cfDNA具有很大难度。游离细胞DNA纯化试剂盒提供了一种从其他污染物中纯化cfDNA的可靠而有效的方法。
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cfDNA的提取对于生命科学，医疗保健和法医学的许多应用至关重要。在产前检测中，从母亲血液中提取的cfDNA可用于确定胎儿的基因组成，这有助于检测任何遗传疾病或染色体异常。在癌症诊断中，血液中cfDNA的存在可用于监测疾病的进展，并评估治疗的有效性。在法医学中，cfDNA的提取用于从犯罪现场发现的血液样本中识别个体。
BcMag ™ 游离细胞DNA纯化试剂盒旨在高效、有序地从人血浆中提取cfDNA。该试剂盒使用我们独特的专有磁珠和优化的缓冲液体系。本试剂盒可以使用游离细胞DNA BCT收集管从100µL至10 ml（通常产生约25纳克cfDNA）的人血浆中高效分离出循环游离细胞DNA（cfDNA）。该程序采用温和的裂解条件，避免了严苛裂解条件对核酸的破坏，如碱性裂解和有毒化学物质裂解细胞；保证了DNA的完整性和避免了残留在样品中有机溶剂耗时的清除过程。纯化的cfDNA具有极高的完整性，可用于各种下游应用，如qPCR，ddPCR，NGS分析等。当与自动化操作设备结合使用时，可以同时分离多个样品。或者，可以使用磁力架手动处理样品。
与传统的分离cfDNA的方法相比，磁珠法具有几个优点。磁珠比玻璃纤维过滤器可以更有效地结合DNA，从而产生更高、更一致的产量。此外，由于没有使用过滤器或真空歧管，因此在提取过程中不会产生堵塞细胞颗粒的情况。这种堵塞问题在富含蛋白质的大体积样品（如血浆）中尤其常见，而这些样品通常被用于cfDNA研究。
cfDNA纯化试剂盒的工作流程
游离细胞DNA纯化试剂盒使用磁珠和特异性结合剂的组合从其他污染物中纯化cfDNA。该试剂盒的工作原理是将cfDNA与磁珠结合，并将其与蛋白质，脂质和RNA等其他污染物分离。然后，纯化的cfDNA可用于下游应用，例如PCR，测序和基因分型。
1. 向样品中加入裂解缓冲液和蛋白酶K以裂解样本并在65°C下孵育。
2. 添加功能性磁珠，并将磁珠和样品溶液，通过涡旋/吹吸方式混匀，结合DNA。
3. 清洗磁珠。
4. 使用磁力架将磁珠与样本溶液分离。
5. 从磁珠上洗脱DNA。
特点和优势
• 可靠有效的纯化：游离细胞DNA纯化试剂盒提供了一种可靠有效的纯化cfDNA的方法，这对于下游应用的准确结果非常重要。
• 高产率：该试剂盒可提供高产量的cfDNA提取方式，这对于需要大量DNA的应用（例如测序和基因分型）至关重要。
• 可根据需要扩大或者缩小实验提取体积。
• 易于使用：该试剂盒易于使用，可以在实验室环境中进行，不需要高深的技术专业知识。
• 多功能：该试剂盒可用于各种体液，包括血液，血浆和其他体液，适用于各种应用。
• 灵活的设计，可以手动或全自动设备分离cfDNA
• 全自动化操作，无需苯酚萃取
• 提取体积范围为100µL到10ml的血浆
• 洗脱溶液体积范围为15µL到50ml
